发现AMPK激酶新底物，增强抗肿瘤能力
武汉大学医学研究院的张金方课题组在Molecular Cell杂志在线发表题为：UFL1 ablation in T cells suppresses PD-1 UFMylation to enhance anti-tumor immunity的文章，揭示靶向AMPK-UFL1-PD-1信号轴能够显著增强抗肿瘤免疫效果，为临床患者提供潜在治疗策略。
本研究从维持细胞稳定的蛋白质类泛素化UFMylation机制出发，发现其E3连接酶UFL1在T细胞中缺失能够降低PD-1的稳定性，促进CD8+ T细胞的活化及其细胞因子的产生，进而增强抗肿瘤免疫力。在机制上，AMPK直接磷酸化UFL1的T536位点，减少UFL1与PD-1的相互作用，从而促进PD-1的降解。
本研究旨在探索T细胞特异性敲除UFL1对抗肿瘤免疫力的影响及其机制，首次确定UFL1是MAPK的底物，通过调控PD-1的稳定性影响T细胞活化状态。研究结果强调AMPK-UFL1-PD-1轴作为潜在的免疫治疗靶点，为提高现有免疫治疗策略疗效提供新思路。
AMPK激酶的应用
UFMylation是近年来新发现的泛素化蛋白修饰系统，其上游调控因子的研究几乎为零。研究人员发现UFL1蛋白的T536位点存在保守的AMPK磷酸化序列，因此推断UFL1可能是AMPK的底物。
AMPK属于丝氨酸/苏氨酸激酶，由α催化亚基和β、γ调节亚基构成三聚体复合物。AMPK是调节细胞能量稳定的关键激酶之一，失调会导致多种疾病。
研究人员将重组GST-UFL1蛋白与具有激酶活性的AMPK（购自SignalChem，货号：P55-10H）共同孵育，进行体外激酶实验。结果显示，AMPK直接磷酸化UFL1，并将Thr536突变为T536A。磷酸化的T536-UFL1特异性抗体（pT536-UFL1）不能检测到UFL1-T536A突变体。在Jurkat细胞中能检测到UFL1中T536位点的内源性磷酸化。结果表明UFL1是AMPK的底物，AMPK激酶磷酸化其T536位点。